细胞在液氮罐中的保存步骤

时间:2018-12-11 10:40来源: 作者:班德液氮罐 点击:
怎么在液氮罐里储存细胞呢?冻存细胞的步骤会影响到细胞复苏时的活力,所以在使用液氮罐储存细胞时应小心并按步骤操作:自增压液氮罐

1、预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷;

2、用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);

3、再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀。

4、在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期。

5、冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐最好;或者可以在4℃;自增压液氮罐
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