探讨外周血单个核细胞的冻存及复苏工艺,实现外周血单个核细胞的长久保存。
液氮罐
冷冻保存1、2、4、8、12和24个月后复苏细胞:取出冻存管,迅速投入37℃水浴中,并不断轻轻摇动,保证管内液体在1min内80%溶解,将细胞吸到6-8mlDMEM洗涤液中,并洗涤冻存管1次,移入50ml离心管中,233×g离心5min。弃上清,加入6ml培养液,轻轻混匀,留取500μl数测细胞活性。
液氮罐
体外人工分离的外周血单个核细胞经过长时间冷冻保存后仍可维持其高活性,并可诱导生成具有抗肿瘤活性的细胞群,该结果对单个核细胞保存、扩增活化的自体淋巴细胞的应用具有重要意义。