液氮罐储存胚胎细胞用于生殖中心
南京10万冷冻胚胎，有很多在等待被“单独两孩”政策“唤醒”
在南京，鼓楼医院、南京市妇幼保健院以及江苏省人民医院的生殖中心，有着不为人知道的大量“液氮罐”。据保守估计，里面冷冻胚胎的数量至少有10万，这些在零下196摄氏度液氮保存的小生命，有不少，正在等待“单独两孩”的政策落地，“破壳而出”。昨天，现代快报《发现》周刊记者就走进鼓楼医院以及市妇幼保健院，为了揭秘那些神秘的液氮罐。
现代快报记者 刘峻 安莹
神秘的液氮罐
每天五六个电话，想解冻“生命”
在鼓楼医院生殖中心，实验室有个最核心的区域，里面存放了一两百个液氮罐子，每个罐只有常见的小瓶液化气罐大小。一打开罐子，里面雾气腾腾，罐内温度始终保持在零下196摄氏度。不要小看这些罐子，里面冷冻的都是一个个“生命”。
根据鼓楼医院的估算，一个罐里大约有400名就医者留下的胚胎，在整个生殖中心，共存放了七八万份的冷冻胚胎，是南京地区保存冷冻胚胎数量最多的地方。
这些罐子里的生命有什么用呢？正巧就碰到一个咨询电话。南京的汪女士在电话中说：“我是2010年做的试管婴儿，2011年生的宝宝，是个女儿。现在国家有单独二孩政策，不知道能不能将冷冻在你们医院的胚胎，拿出来生第二个孩子。”
南京鼓楼医院生殖中心护士王玉说，“单独两孩”即将实施的消息传开后，他们中心每天都会接到一两个这样的咨询电话，而最近这样的咨询电话更多了，达到了一天五六个。“如果政策落地后，符合政策的家庭，就可以将曾经留下的冷冻胚胎解冻。”
这些人的诉求很简单，只要单独两孩政策一落地，可以生第二个孩子，那么这些曾经在这里做过试管婴儿的家庭，将解冻“存放”在这里的冷冻胚胎，植回母体子宫，再生一个试管婴儿。
哪些人存放了冷冻胚胎
数以万计的冷冻胚胎，何人留下？南京鼓楼医院生殖中心主任孙海翔说，一般是三类人群：
**类人群是已经做过一次试管婴儿的人群，他们做成功之后还留下不少剩余的胚胎。比如，一名女性经过药物促排卵后，可以取出好几个卵子，与精子结合后，形成几个胚胎。不过，一次移植用不完这么多，剩下的胚胎就可以冷冻。
女性如果一次移植没有成功，没有怀孕的话，可以再次解冻胚胎进行移植。当然，女性成功怀孕生下孩子，如果符合单独两孩政策，再想生孩子就可以解冻胚胎继续移植。
第二类人群就是女性本来想做试管婴儿的，不过由于自身有疾病，当时不能移植，所以先冷冻，等女性身体恢复后，可以再做移植。
第三类人群，就是女性本身患有盆腔疾病，如果要治疗的话，会损害卵巢功能，会导致不孕。所以这些人就预先冷冻胚胎，存起来。
“罐子”每年增长近20个
孙海翔也有着自己的苦恼，每年罐子都在增多，已经快要没有地方存放了。
孙海翔说，目前国家没有明确的规定，对冷冻胚胎如何处理。原则上说，如果女性试管婴儿成功，分娩过后，生殖中心是可以销毁的。
不过，鼓楼医院生殖中心目前并没有这么做。“问题是保存多久才销毁呢？我们希望国家能有相关规定，有的国家是两年，两年后由生殖中心销毁胚胎。”孙海翔说。
据悉，从2002年，鼓楼医院生殖中心成立至今，每年约有4000名患者成功怀孕，如果这些患者的备用胚胎都保存着，这里的胚胎数量确实可观，也因此医院的液氮罐正在以每年近20个罐的速度在增加。
冷冻胚胎怎样保存
冷冻前，胚胎要先“洗个澡”
记者又探访了南京市妇幼保健院生殖中心的实验室。由于冷冻胚胎对环境要求很高，工作人员进出都必须穿防护服，戴无菌帽、换消过毒的拖鞋，最后洗手才能进入。
一个冷冻胚胎究竟能够存活多久？实验室工作人员曹善仁给出的答案是几十年。在低温下储存一个胚胎，通常要在受精后的三至五天，这时候工作人员会选择**的优质胚胎进行冷冻。
“这些胚胎还停留在细胞阶段，直径只有几百微米。而就是这些如尘埃一般的胚胎最后能孕育成一个胎儿，出生后慢慢长成一个一米八的大小伙子。”听完南京市妇幼保健院生殖中心主任凌秀凤的这段话后，记者不得不感慨生命繁衍的神奇。
在冷冻之前，胚胎要先“洗澡”。工作人员会把这些胚胎浸泡在低温保护性的液体里，这个过程是8~16分钟，这些液体可以去除胚胎体内的湿气，防止冰晶体的形成破坏胚胎。
洗好澡被安排到一毫米宽的“小床”上
“洗好澡”之后，工作人员会拿出一根特殊的吸管，吸管的直径比圆珠笔芯要小得多，另外一头是一个橡皮球，工作人员轻轻一捏橡皮球，这些胚胎就迅速到吸管里了。然后迅速把吸管里的胚胎转移到一个特制的“小床”上，小床只有一毫米宽。
“试管婴儿其实并不是住在‘试管’里。”而是浸泡在装有液氮的泡沫盒里，用镊子套上套筒。每个罐子有10个套筒，可冷冻300人份左右的备用胚胎。为了防止胚胎死亡，工作人员在一分钟之内要把躺在“小床”上的胚胎搬进
液氮罐里进行冷冻。
由于液氮会挥发，工作人员必须每周充两次液态氮。
冷冻胚胎怎样孕育生命
胚胎的“生命复苏”只有一两秒
冷冻的胚胎如何重新解冻，复苏生命？
“这是一个精细活，我们都锤炼过成百上千遍才保证万无一失。”曹善仁说。胚胎的复苏看似复杂，其实过程只有一两秒。工作人员把躺在“小床”上沉睡了几年的胚胎取出之后，放进特殊的解冻液里。这个解冻液能够让胚胎的“体温”在一两秒之内迅速上升到37摄氏度。20分钟以后，胚胎就完全“苏醒”了，工作人员再次拿出吸管，将胚胎放进培养液里。“别看胚胎还只是像尘埃一样大小，但已经是一个生命了，对外面的世界也有了感知，我们认为刚刚从‘冰天雪地’来到‘四季如春’的实验室，胚胎还没有完全复原，需要对外界环境进行适应，因此它需要待在培养液里度过16个小时。等到第二天，它就可以植入到子宫内。”
但是，不是所有胚胎都能植入母体内孕育成生命的。记者了解到，卫生部《人类辅助生殖技术管理办法》有明确规定，35岁以下的妇女**次移植胚胎数量不得超过2个，35岁以上或第二次移植可以放3个，没有移植的胚胎就继续放在液氮罐里冷冻保存，静静沉睡。
冷冻胚胎解冻后存活率在90%以上
试管把胚胎冷冻起来再唤醒，植入妈妈体内的存活率有多高？是否比不上新鲜胚胎？ “实验证明，冷冻胚胎苏醒后移植的成功率不比新鲜胚胎低，一般来说冷冻胚胎解冻后的存活率能够达到90%以上。”
南京市妇幼保健院生殖中心主任凌秀凤说，临床中，医生一般会采集多个卵子，一般来说，获得12-15个卵子的质量是**的。多了，会有些先天不足的卵子滥竽充数，少了，说明母体卵巢功能欠佳，卵子质量也不一定好。 这些卵子通过体外受精培养出胚胎，一般能留下七八个，这些胚胎，会选取两三个培养成胚囊植入妈妈子宫内，称为新鲜胚胎；剩下的就会冷冻起来，称为冷冻胚胎。
“新鲜胚胎的移植成功率多在50%-60%，而冷冻胚胎复苏后的移植成功率也接近如此，这主要是由母体的身体状况决定的，新鲜胚胎移植时，母体多经过了取卵等带有损伤性步骤，子宫内膜恢复情况不一定理想，而冷冻胚胎移植时，母体经过了康复、休息，子宫状况更易于受孕。
