给您 介绍一下细胞培养所用到的设备,而其中
液氮罐也是属于其中的一个重要设备。
一、培养设备
1. 无菌室:为相对密封、防尘、防菌的空间。一般由更衣间、缓冲间和操作间组成(P29)。使用前紫外照射1-2h,每周甲醛、乳酸或过氧乙酸熏蒸2h和每月新洁尔灭檫拭地面和墙壁一次。
2. 超净工作台:为无菌操作装置,有测流、外流和直流式三种。使用前紫外照射10-30min,使用后70%酒精檫拭台面,定期福尔马林熏蒸。
3. CO2培养箱:用于培养细胞。按要求恒定供给CO2(5%)、保持稳定的温度(37℃)、pH值(7.2-7.4)和饱和湿度(95%)。
二、细胞观察与计数设备
1. 倒置显微镜:定期检查细胞生长情况。
2. 细胞计数板和电子细胞计数仪:用于计算细胞数目。
三、细胞保存设备
液氮生物容器:俗称液氮罐,标准大气压下其内温度可低至—190℃,适用于细胞、组织的长期冻存。罐口不密封,要定期加注液氮,加液氮和取材料时要注意保护好眼睛和手脚。
四、消毒灭菌相关设备
1. 压力蒸汽消毒器:可杀灭包括芽胞在内的所有微生物,是灭菌效果**、应用最广的灭菌方法。方法是将需灭菌的物品放在高压锅内(物件不宜过多),加热时蒸汽不外溢,高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。在103.4kPa蒸汽压下,温度达到121.3℃,维持15~20分钟可达灭菌目的。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。使用时要注意锅内的水位,取物时要检查压力是否为零。
2. 无菌过滤器:为除菌设备,分反复适用型和一次性过滤器,使用时一般用微孔直径0.22μm的滤膜。
3. 酸缸:用于去除玻璃器皿壁上的污物。缸内的清洁液(具强腐蚀性,加取物件时需戴胶手套穿长袖工作衣)的配置:称取一定量的重铬酸钾,于干燥研钵中研细,将此细粉加入盛有适量水的玻璃容器内,加热,搅拌使溶解,待冷后,将此玻璃容器放在冷水浴中,缓慢将浓硫酸断续加入,不断搅拌,勿使温度过高,容器内容物颜色渐变深,并注意冷却,直至加完混匀。
4. 电热恒温干燥箱:用于烘干和干热消毒玻璃器皿。注意烘烤物件时一般温度不能超过60℃,烘干后要及时转移物件。
五、移液设备
1. 微量移液器(俗称“枪”)及枪尖:微量移液器分多通道和单通道,单通道常用的规格有0.5-10µl、5-100µl、20-300µl、50-1000µl 和100-5000µl。枪尖有蓝色(1ml)、黄色(200µl)和白色(20µl)三种。
2. 玻璃移液器与洗耳球、细胞吹打管与胶塞。
六、细胞实验相关其他设备
1. 流式细胞仪:在功能水平上对单细胞进行定量分析和分选的检测手段,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。
2. 多功能酶标仪:用于检测溶液的吸光度值。其本质就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。分为单通道和多通道2种类型。
3. 离心机及离心管:用于分离、传代和处理细胞,转速通常在500-5000rpm,离心体积为0.5-50ml不等。
4. 纯水蒸馏器:分蒸馏式和过滤式。
5. 超声波清洗机:对精密工件上的空穴、狭缝、凹槽、微孔、暗洞等处,通常的洗刷方法难以见效,使用超声清洗却可以达到良好的效果。对质地较硬、声反射强的材料清洗效果较好(如金属、玻璃、陶瓷、塑料)。
七、常用培养器皿
1. 玻璃瓶:分配翻盖胶塞的盐水瓶和配塑料螺旋盖的盛液瓶。规格有500ml、250ml、100ml和50ml。
2. 培养瓶:主要用于培养细胞。常用的规格有15ml、25ml、75ml、100ml、200ml、275ml、500ml和1000ml等。
3. 培养皿:按直径分30ml、60 ml、100 ml、150 ml和300 ml。
4. 培养板:根据孔数分6孔(底面积为9.6cm2、加培养液为2.5ml)、12孔(底面积为4.5cm2、
加培养液为2.0ml)、24孔(底面积为2cm2、加培养液为1.0ml)和96孔(底面积为0.32cm2、加培
养液为0.1ml)。
液氮罐